人教版生物必修二DNA的粗提取与鉴定实验总结
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高中生物DNA的粗提取与鉴定实验
(1)鸡血能用猪血代替吗?为什么?不能,因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核,不能提取DNA.
(2)鸡血中为何要加柠檬酸钠?为何要弃去鸡血细胞的上清液?防止血液凝固;因为上清液是血浆,不含细胞和DNA.
(3)胀破细胞的方法?能用生理盐水吗?
向血细胞中加入蒸馏水,使细胞大量吸水而胀破;不能用生理盐水,因为血细胞在蒸馏水中不能吸收水分。
(4)该实验中最好应用玻璃烧杯还是塑料烧杯?为什么? 最好用塑料烧杯,因为玻璃烧杯容易吸附DNA.
(5)前后三次过滤时,所用纱布的层数分别是多少?为什么?
第一次用一层纱布,有利于核物质透过纱布进入滤液;第二次用多层纱布,能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液;第三次用两层纱布,既有利于DNA透过纱布,又能防止其它杂质透过纱布。
(6)若实验中所得黏稠物太少,其原因是什么? 第一次加蒸馏水过少,细胞未充分胀破;第二次加蒸馏水过多或过少;第一次过滤用了多层纱布;第二次过滤用了一层纱布。
(7)两次加入蒸馏水的目的分别是什么?
第一次是为了使血细胞吸水胀破;第二次是为了降低氯化钠的浓度,有利于DNA有析出。
(8)实验中搅拌溶液时,为何总要沿一个方向搅拌? 防止DNA分子受到损伤。
(9)两次析出DNA的方法分别是什么?原理分别是什么?
第一次是加蒸馏水,降低氯化钠的浓度,促使DNA析出;第二次是加入冷酒精,因为DNA不溶于酒精溶液。
(10)三次溶解DNA的液体分别是什么?原理分别是什么?
第 一次、第二次都是用浓度为2mol/L的氯化钠溶液,第三次用的是0.015mol/L(或2 mol/L)的氯化钠溶液。其原理是DNA在氯化钠中的溶解度,是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L 时,DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化钠溶液和0.015mol/L的氯化钠溶液对DNA的溶解度都比较高。
(11)鉴定DNA时为何要用两支试管?其现象分别是什么?
其中不加DNA的试管起对照作用。该试管溶液不变色,另一支加有DNA的试管溶液变蓝色。
高中生物实验条件的控制方法
1、隔绝气体:密封玻璃容器可用石蜡,隔绝空气与液体可用油膜;
排气或充气可依据升温或冷却。
2、增加水中氧气:泵入空气或吹气或放入绿色植物;减少水中氧气:容器密封或油膜覆盖或用凉开水。
3、除去容器中CO2:NaOH溶液;增加容器中的CO2:NaHCO3溶液。
4、除去叶中原有淀粉:置于黑暗环境。
5、除去叶中叶绿素:酒精水浴加热。
6、析出或溶解物质:水溶性根据溶解度,脂溶性可用丙酮或酒精。
7、除去植物光合作用对呼吸作用的干扰:给植株遮光;
8、如何得到单色光:棱镜色散或透明薄膜滤光。
9、实验中控制温度的方法:
①、还原糖,DNA鉴定:沸水浴加热。
②、酶促反应:水浴保温。
③、用酒精溶解叶中的叶绿素:酒精要隔水加热。
④、细胞和组织培养以及微生物培养:恒温箱培养。
⑤、降温,冷却;升温,加热。
10、维持PH:缓冲溶液(HCO3-/H2CO3,HPO43-/H2PO42-);降低加酸或生理酸性盐,升高加碱或生理碱性盐。
11、血液抗疑:加入柠檬酸钠(去掉血液中的Ca2+)。
12、线粒体提取:细胞匀浆离心。
13、动物细胞的处理:破裂用清水,细胞的失水用NaCl。注意搅拌。
14、骨无机盐的除去:盐酸溶液。
15、灭菌方法:培养基用高压蒸汽灭菌;接种环用火焰灼烧灭菌;双手用肥皂冼净,擦干后用75%酒精消毒;实验室或接种箱用甲醛蒸汽或紫外灯灭菌;整个过程都在实验室无菌区或酒精灯旁进行。
16、消除叶片中脱落酸的影响:去除成熟的叶片;
17、消除植株本身的生长素:去掉生长旺盛的器官或组织(芽、生长点);
18、补充植物激素的方法:涂抹、喷洒、用含植物激素的羊毛脂膏或琼脂作载体;
19、补充动物激素的方法:口服(饲喂)、注射;
20、阻断植物激素传递:插云母片法。
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