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高二生物选修1知识点总结(2)

文娟分享

  《探讨加酶洗衣粉的洗涤效果》

  一、基础知识

  3.在本课题中,我们主要探究有关加酶洗衣粉的三个问题:一是普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的 效果有什么不同;二是在什么温度下使用加酶洗衣粉 最好,三是 的洗衣粉,其洗剂效果有哪些区别。

  二、实验操作

  1.探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果

  (1)实验遵循的原则:实验变量为洗涤剂,设计时应遵循 原则、 原则,有效地控制其他变量,如水的用量、污染物的量、所用实验用布的质地大小、两种洗衣粉的用量,搅拌及洗涤时间。

  (2)实验过程

  ①取两只大烧杯并 ,用量筒分别量500mL蒸馏水放入其中,放入400C的水浴锅保温。

  ②将制好的污染布和洗衣粉(一组为 和 ,另一组为 和 )分别放入两只烧杯中。

  ③用玻璃棒同时充分搅拌 时间,一段时间后搅拌可重复进行。

  ④过相同的时间后观察洗涤效果,探究加酶洗衣粉使用时的最适温度。

  2.不同种类的酶洗衣粉对同一污渍的洗涤效果

  (1)实验原理:不同种类的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有 ,所以对不同污渍的洗涤效果不同。

  (2)实验过程:根据表格设计实验步骤

  编号 污渍

  类型 洗涤效果 蛋白酶 脂肪酶 淀粉酶 复合酶 普通洗衣酶 1 鸡血 2 牛奶 3 菜油 4 番茄汁 5 墨水 6 染料 【疑难点拨】

  1.普通洗衣粉中包含哪些化学成分?

  提示:普通洗衣粉中通常包含有:表面活性剂、水软化剂、碱剂、漂白剂等成分,有的洗衣粉中还含有增白剂、香精和色素,以及填充剂等。

  2.在本课题中你打算使用什么方法和标准判断洗涤效果?

  提示:可在洗涤后污物的残留状况,如:已消失、颜色变浅、面积缩小等,

  3.含有蛋白酶的洗衣粉的洗剂效果好,可以用丝绸作为实验材料吗?

  不能。因为丝绸的主要成分是蛋白质,它会被加酶洗衣粉中的蛋白酶分解,损坏衣物。

  【典例解析】

  下列不属于酶制剂的是

  A.蛋白酶 B.脂肪酶 C.淀粉酶 D.麦芽糖酶

  解析:目前常用的酶制剂有四大类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶。其中,应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质,使洗衣粉具有更强的去污能力。

  《酵母细胞的固定化》

  一、基础知识

  酶:优点:催化效率高,低耗能、低污染,大规模地应用于食品、化工等各个领域。

  实际问题:对环境条件敏感,易失活;溶液中的酶很难回收,不能再次利用,提高了生产成本;反应后的酶会混合在产物中,如不除去,会影响产品质量。

  设想:

  固定化酶:优点

  实际问题:一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成 都是通过一系列的酶促反应才能得到的

  设想:

  固定化细胞:优点

  二、固定化酶的应用实例

  高果糖浆是指

  能将葡萄糖转化为果糖的酶是 。使用固定化酶技术,将这种酶固定在一种 上,

  再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底端装上分布着许多小孔的 。酶颗粒无法通过筛板的小孔,而反应溶液却可以自由出入。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与 接触,转化成果糖,从反应柱的下端流出。反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量。

  三、固定化细胞技术

  固定化酶和固定化细胞是利用 或

  方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括 、 和 法。

  一般来说,酶更适合采用 和 法固定,而细胞多采用 法固定化。这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的细胞难以 或 ,而个小的酶容易从 中漏出。

  包埋法法固定化细胞即将微生物细胞 包埋在不溶于水的 中。常用的载体有 、 、 、 和 等。

  四、实验操作

  (一)制备固定化酵母细胞

  制备固定化酵母细胞需要的材料是 、 、 、 、

  、 、 、 、 和

  1.酵母菌的活化

  活化就是处于 状态的微生物重新恢复正常的生活状态。

  2.配制物质的量尝试为0.05mol/L的CaCl2溶液

  3.配制海藻酸钠溶液

  加热溶化海藻酸钠时要注意:

  4.海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合

  5.固定化酵母细胞

  以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的 溶液中,并浸泡 (时间)。

  (二)用固定化酵母细胞发酵

  1.将固定好的酵母细胞用 冲洗2-3次。

  2.发酵时的温度就为 ,时间 。

  五、结果分析与评价

  (一)观察凝胶珠的颜色和形状

  如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明 ;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明 ,制作失败,需要再作尝试。

  (二)观察发酵的葡萄糖溶液

  利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多 ,同时会闻到

  补充:直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化的优缺点:

  类型 优点 不足 直接使用酶 催化效率高,低耗能、低污染等。 对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量。 固定化酶 酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用。 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。 固定化细胞 成本低,操作更容易。 固定后的酶或细胞与反应物不容易接近,可能导致反应效果下降等。

  【疑难点拨】

  1.细胞的活化。

  提示:在缺水的状态下,微生物会处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。酵母细胞所需要的活化时间较短,一般需要0.5~1小时。

  2.如何检验凝胶珠的质量是否合格。

  提示:检验凝胶珠的质量是否合格,可以采用以下方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也表明制备的凝胶珠是成功的。

  3.酶和细胞分别适应哪种固定方法?

  提示:一般来说,酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定,而细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的难以被吸附或结合,而个小的酶容易从包埋材料中漏出。

  【典例解析】

  酶和细胞分别适应哪种固定方法?

  提示:一般来说,酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定,而细胞多采用包埋法 固定化。这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的难以被吸附或结合,而个小的酶容易从包埋材料中漏出。

  《DNA的粗提取与鉴定》

  一、提取DNA的方法

  提取生物大分子的基本思路是 。对于DNA的粗提取而言,就是要利用 、 等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。

  1)DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。

  此外,DNA不溶于 溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步的分离。

  2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解 ,但是对 没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80oC的高温,而DNA在 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ,但对DNA没有影响。

  3)DNA的鉴定 在 条件下,DNA遇 会被染成 色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

  二、实验设计

  1)实验材料的选取 凡是含有 的生物材料都可以考虑,但是使用 的生物组织,成功的可能性更大。在下面的生物材料中选取适合的实验材料:

  鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜)、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基的大肠杆菌

  2)破碎细胞,获取含DNA的滤液 动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的 ,同时用 搅拌,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞,需要先用 溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的 和 ,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。

  3)去除滤液中的杂质

  4)DNA的析出与鉴定

  将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积 、冷却的 ,静置 ,溶液中会出现 ,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒 搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。

  取两支20ml的试管,各加入物质的量浓度为 的NaCl溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml的

  。混合均匀后,将试管置于 中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变 。

  三、操作提示

  以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g ,防止 。

  加入洗涤剂后,动作要 、 ,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要 ,以免 ,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。

  二苯胺试剂要 ,否则会影响鉴定的效果。

  四、结果分析与评价

  【疑难点拨】

  1.为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?

  答:蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),从而释放出DNA。

  2.加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?

  答:洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。

  3.如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?

  答:研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少,影响实验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。

  4.此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?

  答:可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质。

  5.为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?

  答:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。

  6.方案二与方案三的原理有什么不同?

  答:方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开;方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA分离。

  7. DNA的溶解度与NaCl溶液浓度的关系:

  当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时,随浓度的升高,DNA的溶解度降低;当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时,随浓度升高,DNA的溶解度升高。

  8. 制备鸡血细胞液时,要在新鲜的鸡血中加入柠檬酸钠的原因

  制备鸡血细胞液时,要在新鲜的鸡血中加入抗凝剂--柠檬酸钠,防止血液凝固。其原理是柠檬酸钠能与血浆中Ca2+发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的Ca2+大大减少,血液便不会凝固,因为鸡血红细胞,白细胞都有细胞核,DNA主要存在于细胞核中,所以在离心或静置沉淀后,要弃出上层清液--血浆。

  9.提取DNA的第一步是材料的选取,其目的是一定要选取DNA含量较高的生物材料,否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难;第二步是DNA的释放和溶解,这一步是实验成功与否的关键,要尽可能使细胞内的DNA全部溶解;第三步是DNA的纯化,即根据DNA的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性,最大限度地将DNA与杂质分开;最后一步是对DNA进行鉴定,这是对整个实验的结果的检测。

  10.在DNA的析出的步骤中用到玻璃棒搅拌时,注意动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。

  11.盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程的DNA的损失。

  [典例解析]

  本实验中有三次过滤:

  ⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液

  ⑵过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液

  ⑶过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液

  以上三次过滤分别为了获得( )

  A含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液

  B含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、含DNA的滤液

  C含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、纱布上的DNA

  D含较纯的DNA滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液

  答案:A

  解析:用蒸馏水稀释鸡血细胞液,使血细胞的细胞膜、核膜破裂,释放出核物质,此时过滤只能得到含DNA和其他物质如蛋白质的滤液,这种滤液必须经过实验中其他步骤得相继处理,方能得到较纯的DNA。DNA在0.13mol/LNaCl溶液中溶解度最低,成丝状粘稠物,可经过滤留在纱布上。

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