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高中生物实验知识点复习(3)

凤婷分享

  二、观察细胞有丝分裂的实验过程

步骤

注意问题

分析

二、装片的制作

(解离→漂洗→染色→制片)

1.解离:

解离液:质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精的混合液(1:1)

解离时间要保证,细胞才能分散开来。

解离时间也不宜过长。

目的:溶解细胞间质,使组织中的细胞相互分离开来。此时,细胞已被盐酸杀死。

否则,根尖过于酥软,无法取出。

2.漂洗:清水的玻璃皿中漂洗约10 min。

漂洗要充分,可换水1~2次。

目的:洗去解离液,便于染色。

3.染色:质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。

染色时间不宜过长,否则显微镜下一片紫色,无法观察。

龙胆紫等为碱性染料,可使染色体着色。醋酸洋红溶液也能使染色体着色

4.制片:用镊子将这段洋葱根尖取出来,放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子尖把洋葱根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片。然后,用拇指轻轻地压载玻片,使细胞分散开来。

要弄碎根尖,再垂直向下均匀用力压片,不可移动盖玻片,

目的:使细胞分散,避免细胞重叠,便于观察。做得成功的装片,标本被压成云雾状。

三、观察

1.低倍镜观察:把装片放在低倍镜下,慢慢移动装片,找到分生区细胞。

2.高倍镜观察:移走低倍镜,换上高倍镜,用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰,仔细观察,找出处于细胞分裂期中期的细胞,再找出前期、后期、末期的细胞。

一定要找到分生区。

在一个视野里,往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。可以慢慢地移动装片,从邻近的分生区细胞中寻找。

分生区细胞特点是:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正处于分裂期。

  三、讨论

  制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么?

  答:制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键有以下几点:

  (1)剪取洋葱根尖材料时,应该在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活跃的时间;

  (2)解离时,要将根尖细胞杀死,细胞间质被溶解,使细胞容易分离;

  (3)压片时,用力的大小要适当,要使根尖被压平,细胞分散开

  实验十五 低温诱导染色体加倍

  一、实验原理与步骤:

  原理:用低温处理植物分生组织细胞,能抑制纺锤体的形成,以致影响染色体被拉向两极,细胞也不能分裂成两个子细胞,于是,植物细胞的染色体数发生变化。

  步骤:⑴低温诱导。⑵卡诺氏液中浸泡以固定细胞的形态,再用95%的酒精冲洗2次。⑶制作装片(解离、漂洗、染色、制片)。⑷显微镜观察。

  二、课后讨论题答案:

  低温诱导和秋水仙素处理都是通过抑制分裂细胞内纺锤体的形成,使染色体不能移向细胞两极,而引起细胞内染色体数目加倍。卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid) 适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖,花药压片及子房石蜡切片等.有极快的渗透力,根尖材料固定15—20min即可,花药则需1h左右,此液固定最多不超过24h,固定后用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止;如果材料不马上用,需转入70%酒精中保存.固定液的重要特性是能迅速穿透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整性,还要能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色效果。

  配方:无水酒精3份、冰醋酸1份、或无水乙醇6份,氯仿3份,冰醋酸1份。

  实验十六 调查常见的人类遗传病

  一、实验原理与步骤:

  原理:显性遗传病具有世代相传的特点,隐性遗传病隔代出现。伴X染色体隐性遗传病的遗传特点是交叉遗传,隔代出现,患者男性多于女性。伴X染色体显性遗传病的遗传特点是世代相传,患者女性多于男性。

  步骤:①确定要调查的遗传病,掌握其症状及表现 ②设计记录表格及调查要点③分多个小组调查,获得足够大的群体调查数据④汇总结果,统计分析

  二、注意事项:

  1、调查时,最好选取群体中发病率较高的单基因遗传病,如红绿色盲、白化病、高度近视(600度以上)等

  2、为保证调查的群体足够大,小组调查的数据,应在班级和年级中进行汇总

  某遗传病的发病率=某种遗传病的患病人数/某种遗传病的被调查人数

  实验十七 探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度

  一、实验原理:

  植物插条经生长素类似物处理后,对植物插条的生根情况有很大的影响,而且用不同浓度、不同时间处理其影响程度亦不同。其影响存在一个最适浓度,在此浓度下植物插条的生根数量最多,生长最快。

  二、实验注意事项

  1. 选择插条:以1年生苗木为最好(1年或2年生枝条形成层细胞分裂能力强、发育快、易成活)

  2. 处理插条:枝条的形态学上端为平面,下端要削成斜面,这样在扦插后可增加吸收水分的面积,促进成活。

  3. 处理方法:

  1)浸泡法:把插条的基部浸泡在配制好的溶液中,深约3cm,处理几小时至一天。(要求的溶液浓度较低,并且最好是在遮阴和空气湿度较高的地方进行处理)

  2)沾蘸法:把插条基部在浓度较高的药液中蘸一下(约5s),深约1.5cm即可。

  实验十八 探究培养液中酵母菌数量的动态变化

  一、实验原理:

  1.在含糖的液体培养基(培养液)中酵母菌繁殖很快,迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群,通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。

  2.养分、空间、温度和有毒排泄物等是影响种群数量持续增长的限制因素。

  二、酵母菌计数方法:抽样检测法或显微计数法(用血球计数板)。

  先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入。多余培养液用滤纸吸去。稍待片刻,待细菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算试管中的酵母菌总数。

  注意:从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管轻轻震荡几次。

  实验十九 土壤中动物类群丰富度的研究

  一、实验原理:

  1.土壤不仅为植物提供水分和矿质元素,也是一些动物的良好栖息场所。研究土壤中动物类群的丰富度,操作简便,有助于理解群落的基本特征与结构。

  2.许多土壤动物有较强的活动能力,而且身体微小,因此不能用样方法或标志重捕法进行调查。在进行这类研究时,常用取样器取样的方法进行采集、调查,即:用一定规格的捕捉器(如采集缺罐、吸虫器等进行取样)。

  二、丰富度的统计方法:记名计算法和目测估计法。

  记名计算法是指在一定面积的样地中,直接数出各种群的个体数目,这一般用于个体较大,种群数量有限的群落。

  目测估计法是按预先确定的多度等级来估计单位面积上个体数量的多少。等级的划分和表示方法有:“非常多、多、较多、较少、少、很少”等等。
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